本文發(fā)表于《中國輸血雜志》，該期刊由中國輸血協(xié)會(huì )暨中國醫學(xué)科學(xué)院主辦，系北大核心期刊、CSCD核心期刊、統計源期刊

　　原文名稱(chēng)為：一種化學(xué)發(fā)光檢測試劑在血液篩查中的應用評估

　　隨著(zhù)社會(huì )經(jīng)濟的持續發(fā)展，人口流動(dòng)的日益頻繁，梅毒、艾滋、乙肝、丙肝等傳染性疾病的感染越來(lái)越多，而因輸血殘余風(fēng)險所引起的血液安全問(wèn)題引起了人們的高度重視，輸血殘余風(fēng)險是由于現行的血清學(xué)檢測技術(shù)檢測的是抗原或/和抗體，存在“窗口期”、病毒變異、免疫沉默等原因而導致，因此采用靈敏度性更高、特異性更好的篩查方法來(lái)保證血液安全，已成為廣大血站工作人員的責任。

　　根據《血站技術(shù)操作規程(2012版)》第4章節“血液檢測”所規定的可經(jīng)輸血傳播感染的檢測項目及檢測方法，目前國內實(shí)驗室對無(wú)償獻血者血液篩查主要采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，但大部分醫院實(shí)驗室對乙肝、丙肝、艾滋的檢測早已采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)。CLIA具有靈敏度高、特異性好、分離簡(jiǎn)便、快速、試劑無(wú)毒、安全穩定、可自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。由于目前沒(méi)有國產(chǎn)CLIA試劑取得“藥字”號注冊資格，只有少數進(jìn)口企業(yè)的產(chǎn)品可以應用，且使用成本相對較高，限制了CLIA在血液篩查方面的推廣應用。本實(shí)驗主要對國產(chǎn)CLIA設備的穩定性、可靠性以及試劑的靈敏性、特異性進(jìn)行評估，為CLIA檢測技術(shù)在血站實(shí)驗室的開(kāi)展提供數據支持。

　　標本來(lái)源

　　深圳市血液中心采集2 163份無(wú)償獻血者標本，7ml EDTA-K2 抗凝血2管，其中男性1 348人，女性815人，標本保存于4℃冰箱，4h內分離血漿，于48-72h內完成檢測。

　　儀器及試劑

　　酶聯(lián)免疫試劑：HBsAg(Sorin, 批號：D329510-1);

　　艾滋(biorad, 批號：5C0391);

　　核酸檢測試劑：Procleix Ultrio assay 試劑(Chiron Gene-Probe)(批號：036030091506134Emeryville, San Diego, CA, USA);

　　化學(xué)發(fā)光試劑：CLIA磁微?；瘜W(xué)發(fā)光試劑(邁瑞公司，批號：20150402);

　　HBsAg定量試劑：羅氏診斷公司(批號：165611);

　　美國雅培公司(批號：20150401)全自動(dòng)加樣儀和全自動(dòng)酶免分析系統(瑞士Hamilton);

　　Procleix TIGRIS System 全自動(dòng)核酸檢測分析系統(美國諾華);

　　化學(xué)發(fā)光儀(邁瑞CL-2000i)。

　　方法

　　每份血樣采用ELISA進(jìn)行HBsAg、抗HIV的檢測，Procleix TIGRIS System 檢測核酸，同步進(jìn)行CLIA的檢測。若CLIA結果與ELISA或者NAT檢測結果不符，挑選標本，重新檢測3次。重測后結果仍然不相符，HIV樣本送深圳市疾病預防控制中心確認，HBsAg不符標本采用羅氏以及雅培HBsAg定量檢測進(jìn)行第三方試劑驗證。

　　討論

　　我們對 2 163 份無(wú)償獻血者標本進(jìn)行了HIV ELISA、核酸以及CLIA的同步檢測，其中核酸檢測為全陰，CLIA有反應性的有4例，包括了ELISA有反應性的3例。CLIA與血站檢測結果的陽(yáng)性符合率為100%，陰性符合率為99.07%。在所有的HIV CLIA 無(wú)反應性標本中，超過(guò)99%的COI值小于0.5，說(shuō)明該國產(chǎn)試劑具有良好的特異性，雖然在HIV的檢測方面，CLIA與ELISA法無(wú)統計學(xué)差異，但從輸血安全考慮，CLIA法比ELISA法表現更好。我們還發(fā)現1例血站檢測結果與雅培、羅氏和邁瑞結果均不一致，存在著(zhù)漏檢的風(fēng)險。該樣本的S/CO值為0.68。無(wú)論是從統計學(xué)角度還是輸血安全方面考慮，CLIA法比ELISA法更優(yōu)異。

　　綜上所述，在HIV檢測上，國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑表現了良好的敏感性與特異性，但需要擴大標本量進(jìn)一步評估試劑性能。在乙肝的檢測方面，CLIA具有比ELISA更好的敏感性與特異性，更有應用前景。在HBsAg檢測上，國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑的敏感性與特異性明顯比ELISA更好，并且發(fā)現了1例標本具有“漏檢”風(fēng)險。結合以上數據與理論研究分析，將化學(xué)發(fā)光法與NAT檢測相結合的方案，在采供血機構值得推廣，能進(jìn)一步保障血液安全。